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人主动脉平滑肌细胞

更新时间:2024-05-20 14:20:46 编号:21db1t89b41db
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何君

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关键词
人主动脉平滑肌细胞,主动脉平滑肌细胞,原代细胞
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其它
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其它

人主动脉平滑肌细胞

人主动脉平滑肌细胞

基本属性:

细胞名称:人主动脉平滑肌细胞 

组织来源:主动脉组织

商品货号:LZ-YX9394

种属来源:

产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介:

人主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%


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使用方法:

人主动脉平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在技术部标准操作流程下,可传5代左右;3代以内状态佳,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

人主动脉平滑肌规格3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

人主动脉平滑肌品牌3.上海 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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原代细胞试用的实验类型:

前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节,这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后,它可适用哪些研究呢?

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验,如下:

一、细胞增殖检测:

常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验



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上海联祖生物科技有限公司
  • 赵雯雯
  • 上海 奉贤
  • 有限责任公司
  • 2020-02-18
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  • ELISA试剂盒,pcr试剂盒,生物试剂
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