白蛋白含量试剂盒微量法

白蛋白含量试剂盒微量法说明书

微量法 100管/96样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

产品名称：白蛋白含量试剂盒微量法

货号：LZ-S01372

规格 : 100管/96样

测试方法:微量法

产品分类：蛋白含量测定系列

发货地：上海

测定意义：

白蛋白由肝实质细胞合成，在血浆蛋白中含量多，具有重要的生理功能，包括维持胶体渗透压，并可与长链脂肪酸、胆汁酸、胆红素、血红素、钙和镁离子等物质结合。它拥有抗氧化性和抗凝血性，能充当营养物质和药物的运输载体，同时也是血浆PH值的缓冲剂。血清白蛋白含量直接关系到肝脏疾病、肾脏疾病、营养不良或蛋白流失性肠道病症的发展，是临床检测的一个重要指标。

测定原理：

白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物，在波长630nm处有吸收峰，在一定范围内其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。

标准品：液体 0.5mL×1 瓶，4℃保存。

NAD+和 NADH 的提取：

1 血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取：按照血清（浆）体积（mL）：酸性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：按照血清（浆）体积（mL）：碱性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 碱性提取液），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2 组织中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1g组织，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1g组织，加入 1mL 碱性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入1mL 酸性提取液），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱性提取液体积（mL）500~1000：1的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

操作步骤:

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样,不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

生化检测试剂盒常见问题：

在使用生化检测试剂盒时，可能会遇到一系列常见问题，这些问题主要涉及到试剂盒的使用、保存、有效期、样本处理以及实验操作等方面。以下是一些常见的问题及其解决方法：

一、‌测定原理‌：生化试剂盒通过化学反应或酶促反应测定样本中物质的含量或酶活性。常用的仪器包括分光光度计和酶标仪，它们的测定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水质、动植物组织、血清、细胞细菌、食品等样本均可进行测定‌。

‌二、选择不同规格的试剂盒‌：根据实验的实际情况选择合适的试剂盒。如果实验室有酶标仪且具备检测波长，可以选择微量法试剂盒；如果有分光光度计及相应规格的比色皿，则可以选择常量法或微量法试剂盒。建议购买前仔细阅读说明书，确认自备的仪器和试剂是否符合要求‌。

‌三、保存方法‌：收到试剂盒后，如果暂时不用，应按照外包装上指示的温度保存。拆开包装后，应按照每个试剂的保存温度进行保存，注意有些试剂忌反复冻融，有些粉剂溶解后性质不稳定‌。

四、‌有效期‌：一般生化试剂盒的有效期为6个月，也有特殊货号的有效期为1年。具体以实际收到货物的标签信息为准‌1。

‌五、样本处理‌：新鲜样本和冷冻样本都可用于大多数指标的测定，但有些生理活性物质容易降解，建议使用新鲜样本测定。对于冷冻样本，建议在-70℃或液氮中保存。样本在不同温度下的保存时间有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存3个月‌。

‌六、土壤酶活性测定‌：对于土壤酶活性的测定，建议将鲜土风干并过筛后取样，以测定的重复性。若使用鲜土测定，需样本的颗粒大小一致且水分含量相似‌。

七、‌预测定‌：在进行正式测定前，建议选择2-3个预期结果差别较大的样本做预实验。通过预测定可以全面反映样品特点、试剂质量、仪器设备稳定性和操作规范性，确保正式测定结果真实可靠‌。

公司正在出售的产品：

C4结合蛋白β(C4BPβ)重组蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)

BLK Protein Human 重组人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 标签)

ADAM15重组小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 标签) Protein

DLL1 Protein Rat 重组大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 标签)

LILRA3重组人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠硫氧还蛋白结合蛋白2(TBP2)ELISA试剂盒 ，英文名： TBP2 ELISA Kit

人上皮膜抗原(EMA)ELISA检测试剂盒HumanEpithelialmembraneaigen,EMAELISAKit 96T/48T

大鼠胰蛋白酶原-1 试剂盒 Rat ypsinogen 1 ELISA Kit

英文名称抗自体抗体规格：96T/48T

父母印记(IMPRIING)基因克隆技术试剂盒5次

ELISAKitNGAL人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白规格：48T/96T

KYNU重组小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 标签) Protein

TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)重组蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

RUVBL1重组人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 标签) Protein

BLK Protein Human 重组人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 标签)

MET Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

白蛋白含量试剂盒微量法小鼠成纤维细胞生长因子12(FGF12)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF12 ELISA Kit

人天青杀素(AZU)ELISA检测试剂盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T

大鼠0酸3激酶(PI3K)试剂盒 Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit

英文名称RatTestoteroneELISAKit大鼠睾同(Testoterone)ELISAKit规格：96T/48T

酵母细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次

ELISAKitDAF/CD55人衰变加速因子规格：48T/96T