兔鼓膜上皮干细胞

兔鼓膜上皮干细胞

基本属性：

细胞名称：兔鼓膜上皮干细胞 

组织来源：鼓膜

商品货号：LZ-YX10505

种属来源：兔

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

鼓膜也称耳膜，为一弹性灰白色半透明薄膜，将外耳道与中耳隔开。鼓膜穿孔不能愈合，可能与干细胞受损或增殖抑制有关。鼓膜上皮干细胞的分布与鼓膜的血供丰富的区域一致。鼓膜上皮干细胞高表达β1整合素，有很强的黏附型，对Ⅳ型胶原的黏附鼻其他细胞更快、更强。

培养基：原代角质形成细胞培养体系

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：铺路石状细胞，不规则细胞

传代特性：根据细胞特性

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

兔鼓膜上皮干细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈铺路石状细胞，不规则细胞，在技术部标准操作流程下，根据细胞特性，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；

3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

原代细胞试用的实验类型：

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节，这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后，它可适用哪些研究呢？

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验，如下：

一、细胞增殖检测：

兔鼓膜上皮干细胞品牌常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL

四、细胞转移能力检测

兔鼓膜上皮干细胞规格常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验

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